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标題ELISA實驗的結果判定

   

提供者:恒遠免疫學第三方檢測中心    發布時間:2019/8/1   閱讀次數:86次 >>進入該公司展台
 臨床ELISA試劑盒測定按其表示測定結果的方式分為定性和定量測定兩大類。定性測定隻是對标本中是否含有待測抗原或抗體作出“有”或“無”的結論,分别用“陽性”和“陰性”來表示。可見定性測定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測定,以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測定則是對标本中待測抗原的多少進行量值測定,以具體數值表示。定量測定基本上是用于非病原體抗原物質的測定,如激素、細胞因子、腫瘤标志物、小分子藥物等。目前國内在臨床上應用的 ELISA試劑盒絕大部份是用于傳染性病原體的抗原或抗體的定性測定,也有少部份用于αFP、hCG、細胞因子等的定量測定。ELISA定性測定的“陽性”和“陽性”的判定依據是試劑盒所确定的陽性判定值(Cut-off)。定量測定的“量值”依據是試劑盒中所帶标準品同時測定得出的劑量反應曲線(又稱标準曲線)。有關ELISA定性和定量測定結果的數據處理後面将有專門章節讨論。本處隻想強調的一點是,ELISA定性測定的“陰性”和“陽性”結果的判定依據隻能是試劑盒本身所确定的Cut-off值,而不能以衛生部臨床檢驗中心供應弱陽性定值質控血清。為什麼要強調這一點呢?主要是因為以前有很多基層實驗室均使用衛生部臨床檢驗中心供應的弱陽性定值質控血清(以前也稱“臨界值”血清)的測定吸光度來判定結果,高于其判為陽性,反之為陰性,而不管試劑盒Cut- off值為何。到目前為止,仍有一些實驗室在堅持這種錯誤的做法。試劑盒的Cut-off值的設立是建立在一系列科學試驗及統計學研究的基礎上的(詳見後述),而衛生部臨床檢驗中心供應的弱陽性定值質控血清主要是供臨床實驗室進行室内質控時使用。
 
    ELISA定性測定結果判定中常用的一些縮寫。
    (1)S/CO:其中S為Sample(樣本)或Specimen(标本)的簡寫,表示的是标本測定的吸光度值,CO為Cut-off值的簡寫。除競争抑制法外,其它ELISA定性測定模式中,當S/CO值大于或等于1時,标本的測定為陽性,小于1時為陰性。
 
    (2)S/N或P/N:其中S同(1),N為Negative(陰性對照)的簡寫,P為Patient(患者)的簡寫。較早的試劑盒很多都使用S/N或 P/N≥2.1為陽性判定标準,現仍有一些試劑盒使用這種方式。這種方式與S/CO方式無根本性區别,隻不過是前者将陰性對照(N)的2.1倍視為Cut -off值而已。
 
    結果報告及解釋
    臨床ELISA測定結果的報告較為簡單。定性測定報陰性或陽性即可;定量測定則報出具體的數值。結果解釋比較起來要複雜的多,它要求實驗室技術人員對所測定的項目有較為全面的知識基礎。例如,對乙肝“兩對半”結果的解釋,不但要求檢驗者要知道不同的結果模式的臨床意義,而且必須對乙肝病毒的分子生物學、分子的變異及其對表型的影響有更深層次的了解。現在,檢驗不再是單純的實驗室測定,而已成為一門臨床醫學學科,即檢驗醫學,這就要求從事醫學檢驗工作的檢驗醫師,對所做的測定項目除了知其然,還要知其所以然,否則就難免為時代所淘汰。
 
    綜上所述,盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單,但有可能會影響測定結果的因素卻較多,分布在測定操作的各步之中,尤以加樣、溫育和洗闆為甚。

關鍵詞:ELISA試劑盒  

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